冬奧會新亮點：興奮劑檢測將首次采用DBS干血斑（點）技術
虎年大年初四 (2022年2月4日)，在歡度新春佳節(jié)之際，我們也將迎來2022北京冬奧會。
本屆冬奧會有眾多精彩看點，身形矯健、奮勇拼搏的運動員，激動人心、動人心魄的雪上運動賽項，還有多項頂尖科技將集體亮相，創(chuàng)下歷屆冬奧會第一：第一個全5G覆蓋的國際重大體育賽事；媒體轉播全面上云；“冰絲帶”(國家速滑館)是目前世界上最大的采用二氧化碳跨臨界直冷制冰技術打造的多功能全冰面，碳排放趨近于零；DBS干血斑技術正式成為冬奧會興奮劑檢測方法……
北京冬奧會興奮劑檢測的新亮點：?DBS
一直以來，為保證體育賽事的公平公正公開，興奮劑檢測已成為運動員們賽前必不可少的體檢項目。
興奮劑檢測可采用尿檢和血檢。尿檢的取樣需要由專人陪同，涉及“隱私性”;血檢則強調專業(yè)性和程序正確性，必須由具備醫(yī)學資質的專業(yè)人士，嚴格使用取血器材來抽取血樣，且抽血程序需要得到運動員的認可和簽字確認。
自2019年某運動員在興奮劑檢測中砸碎血樣瓶引發(fā)國際體壇重大風波后，WADA(世界反興奮劑組織)就計劃引入一種新型的樣本采集方式，力求解決運動員興奮劑檢測的取樣問題，避免同類事件再次發(fā)生。同年10月，由WADA牽頭發(fā)起，包括中國反興奮劑中心在內的全球7大國家反興奮劑中心和國際組織共同決定將大力推行DBS方法，目標在2022年北京冬季奧運會和殘奧會上實現(xiàn)使用DBS作為常規(guī)方法進行興奮劑檢測。
DBS (Dried Blood Spot)的中文是干血斑 / 干血點(將指血滴在專用卡紙上，干燥后形成的斑點),可用于微量血液樣本的儲存、運輸和分析檢測。與傳統(tǒng)的血檢方式相比，DBS具有獨特的優(yōu)勢：采集方便，可由運動員自行獨立完成;微量采樣，幾滴指血即可;固態(tài)血液樣品安全、穩(wěn)定，運輸和儲存方便。
因此，DBS在運動員興奮劑檢測中的應用，不僅適用于更大規(guī)模、更大覆蓋面的檢查，進而更有力地打擊使用興奮劑的違規(guī)者;還可以更好地保護運動員的隱私，提高運動員對于興奮劑檢測的依從性，尤其是在全球新冠病毒大流行的背景下，DBS可以通過更少的人際接觸展開興奮劑的檢查工作。
解決?DBS分析“痛點”?，?CAMAG領跑反興奮劑檢測
隨著DBS方法在興奮劑檢測中的大力推廣應用，興奮劑檢測的頻率和覆蓋面將大幅增加。然而，在海量的樣品面前，傳統(tǒng)的DBS樣品前處理方法已經不再適用，打孔-洗脫-超聲-離心等多步驟，不僅費時耗力，而且難以質控，也成為DBS分析的最大瓶頸。
鑒于此，瑞士 CAMAG 公司依靠多年來在DBS樣品處理領域積累的豐富經驗和技術，推出新一代全自動干血斑樣品處理系統(tǒng)：DBS-MS 500 HCT。“DBS-MS 500 HCT可直接萃取DBS樣品，連續(xù)制備2,000個樣品，1個樣品的制備僅需2分鐘，無縫偶聯(lián)主流的液相色譜串聯(lián)質譜LC-MS/MS，高效實現(xiàn)樣品全自動分析，并適用于萃取痕量的內源性和外源性物質?！盋AMAG 中國總代理力揚企業(yè)的產品經理介紹說。
一直以來，DBS分析過程中斑點面積還原成全血體積的準確性是一個“痛點”問題。由于每個人的HCT(血細胞比容)不一樣，轉換因子會受到HCT的影響，因此，測量HCT就成為了一個突破口。
由于運動員在運動前后會有大量體液的流失，這會造成HCT發(fā)生劇烈的變化，從而降低其DBS興奮劑檢測的準確性。新一代全自動干血斑樣品處理系統(tǒng)DBS-MS 500 HCT裝有HCT分析模塊，通過分析每個DBS樣品的HCT值，可以消除HCT對全血體積定量不準確性的影響，從而大幅提高分析的準確度，進而大幅提高運動員DBS興奮劑檢測的準確性。
目前DBS-MS 500 HCT已成功應用于自行車運動員的興奮劑檢測。曲馬多(Tramadol)，是一種阿片類藥物 ，主要用作鎮(zhèn)痛藥，可緩解普通到嚴重的疼痛。由于其在競技自行車運動中的濫用，2019年國際自行車聯(lián)盟已將其列為禁用藥物。針對曲馬多 (tramadol)及其代謝物O-去甲基曲馬多(O-desmethyltramadol)，CAMAG 開發(fā)了一種方法，能夠實現(xiàn)4分鐘從樣品到結果的全自動分析(圖1)。研究者對26個真實樣品的進行傳統(tǒng)血檢和DBS檢測，并將兩種方法進行了交叉驗證。結果顯示，借助DBS-MS 500 HCT，DBS檢測和傳統(tǒng)血檢的結果一致性良好(圖2)，證明了DBS興奮劑檢測的可行性。
圖 1
圖 2
DBS興奮劑檢測?，中國在行動
反興奮劑是一項長期而艱決的工作，需要全球各國的共同合作與努力。中國反興奮劑中心作為全球DBS項目的發(fā)起者之一，全方位參與項目的規(guī)則和方法研究。中國反興奮劑中心主任陳志宇表示，在全面總結、汲取備戰(zhàn)東京奧運會史上最嚴反興奮劑工作成功經驗基礎上，中國反興奮劑中心結合冬季項目備戰(zhàn)的特點，制定了“更嚴”的北京冬奧會反興奮劑工作方案和措施，以“零容忍”的態(tài)度全力實現(xiàn)北京冬奧會興奮劑問題“零出現(xiàn)”目標。
反興奮劑中心與國際同行合作開展的干血點檢測項目將在2022年北京冬奧會和冬殘奧會中執(zhí)行。2021年6月，反興奮劑中心發(fā)布《反興奮劑中心關于開展干血點興奮劑檢查的通知》，并正式啟動DBS興奮劑檢查檢測工作。截至2021年10月底，北京冬奧會備戰(zhàn)興奮劑檢查總例數(shù)已突破4000例，到運動員進村，還將實施超過2000例檢查。