DBS 干血斑應(yīng)用特集 2: 精準(zhǔn)品種鑒定 (基因分型)
你能分得清以下兩對
狗狗分別是什么品種嗎？
如今飼養(yǎng)寵物成了不少民眾增添生活樂趣的方式。隨著寵物市場的快速發(fā)展，人們對于寵物的品種、血統(tǒng)等信息有著更高的關(guān)注。然而在 “寵物經(jīng)濟” 升溫的同時，寵物消費糾紛也頻頻發(fā)生。據(jù)國內(nèi)一項消委會的調(diào)查2，寵物消費類投訴主要聚焦于寵物宣傳與實際不符。其中，最主要問題是商家以低價品種冒充高價品種賣給消費者以謀取暴利。
動物的品種鑒定方法比較
目前對寵物品種鑒定主要是通過對動物的外貌特征和行為特征進行分析和比較，這對于普通消費者具有不小的難度。如上圖所示，本身有些品種的寵物外貌就極其相似，再加上 “寵物美容” 的加工，基本可以達到真假難辨的程度。
相比于外貌和行為特征，遺傳特征可以更準(zhǔn)確地鑒定動物的品種，比如基因分型就是一種動物的精準(zhǔn)品種鑒定方法。通過對動物的 DNA 進行 PCR (聚合酶鏈反應(yīng)) 擴增和測序，可以檢測特定的基因或基因組合，從而精準(zhǔn)地確定動物的品種。
該技術(shù)對品種鑒定的準(zhǔn)確率遠(yuǎn)高于外貌和行為特征鑒定的方法。它不僅可以用來進行鑒定寵物品種的鑒定，還可以準(zhǔn)確鑒定寵物的血緣關(guān)系 (如父母、兄弟姐妹等)，篩查寵物遺傳疾病和輔助寵物的選種育種等工作。另外，基因分型也是寵物個體永久且不可偽造的身份標(biāo)識，可用于對丟失或被盜的寵物進行身份鑒定。
動物的精準(zhǔn)品種鑒定應(yīng)用領(lǐng)域
動物精準(zhǔn)品種鑒定除了上述在寵物市場方面的應(yīng)用，在其它領(lǐng)域也具有十分重要的應(yīng)用：
– 通過進行精準(zhǔn)的品種鑒定，可以檢測動物是否攜帶特定的遺傳疾病基因，從而幫助飼主更好地了解寵物的健康狀況，進行相應(yīng)的健康管理和疾病預(yù)防。
– 在畜牧業(yè)中，對于畜禽的品種和血統(tǒng)信息管理，以及對于提高養(yǎng)殖效益和優(yōu)化育種計劃具有重要意義。
– 在科研領(lǐng)域，需要對實驗動物野生型和突變型進行精準(zhǔn)的鑒定，研究特定基因分型對于生理、病理和藥物的影響。
– 在動物保護領(lǐng)域，通過對野生動物進行精準(zhǔn)的品種鑒定，可以更好地了解野生動物的遺傳多樣性、種群結(jié)構(gòu)和遷徙路徑等信息，從而進行科學(xué)研究和保護管理。
干血斑：方便的血樣采集
目前用于動物品種鑒定的基因分型采用的方法是 PCR 法 (聚合酶鏈反應(yīng))，需要在診所由醫(yī)師抽取寵物的靜脈血液進行采樣。靜脈取血的取血量大，且過程比較復(fù)雜，需要動物醫(yī)師具有豐富的經(jīng)驗和飼主的配合。取血過程中，寵物往往會出現(xiàn)抵觸情緒，有時甚至?xí)艿襟@嚇。
干血斑 (Dried blood spots, DBS) 是一種新型的血液采集和儲存方法。它將微升級末梢血采集到樣品卡上，干燥后形成斑點。該方法采樣過程簡單方便，飼主可自行操作；侵入性小，特別適合對小型動物 / 寵物和實驗動物進行血樣采集。相比于液態(tài)血，固態(tài)的干血斑具備更好的穩(wěn)定性和生物安全性，可實現(xiàn)樣品的常溫運輸，更可以以更溫和的條件儲存樣品，構(gòu)建生物樣本庫。?
DBS 干血斑應(yīng)用案例:
轉(zhuǎn)基因小鼠的基因分型
轉(zhuǎn)基因小鼠在繁殖后，由于基因重組，第二代小鼠需要進行轉(zhuǎn)基因遺傳鑒定，以保持傳代后基因型的一致。目前的通常做法是剪取小鼠尾部或耳部組織樣品，然后提取核酸進行鑒定。而干血斑采樣是一種微創(chuàng)采樣技術(shù)，創(chuàng)口小，需要的血量小，可減少小鼠損傷。
樣本
轉(zhuǎn)基因小鼠干血斑 (客戶提供的純化核酸樣本)?
檢測目標(biāo)
轉(zhuǎn)基因小鼠特異性基因序列
卡片
Ahlstrom AutoCollectTM?
樣本運輸條件
室溫
提取方法
直接提取，spin column 純化
檢測方法
PCR (聚合酶鏈反應(yīng))，瓊脂凝膠電泳
結(jié)果
通過 DBS 干血斑微量采樣，可成功鑒定出小鼠基因型。其方便、微量的采血和樣本室溫運輸?shù)奶攸c使其在動物的精準(zhǔn)品種鑒定領(lǐng)域具有巨大的發(fā)展?jié)摿Α?/p>
同期加推
第十五屆東西部小動物臨床獸醫(yī)師大會，集合由 57 個省市小動物獸醫(yī)師學(xué)（協(xié)）會的力量，共同舉辦。大會旨在推動中國小動物臨床獸醫(yī)技術(shù)與國際接軌，提升中國小動物獸醫(yī)師的整體水平，推廣世界先進小動物診療技術(shù)，展示國際領(lǐng)先的寵物醫(yī)療設(shè)備、寵物藥品、飼料及試劑等。
大會將于 2023 年 5 月 23 日 – 25 日在青島舉行，力揚將參展此次盛會，推出 CAMAG 全自動干血斑萃取系統(tǒng) DBS-MS 500，從自動化方向?qū)鹘y(tǒng)干血斑技術(shù)進行的一次全面升級，可實現(xiàn)全自動、快速、無人值守的干血斑樣品制備，并可結(jié)合質(zhì)譜、PCR、NGS 測序及 ELISA 等檢測技術(shù)，應(yīng)用于以下領(lǐng)域：
健康生物標(biāo)記物檢測
治療藥物監(jiān)測
基因組檢測
感染檢測
生物樣本庫
藥物的臨床前試驗
食品安全
