DBS 干血斑應(yīng)用特集 2: 精準(zhǔn)品種鑒定 (基因分型)
你能分得清以下兩對
狗狗分別是什么品種嗎？
如今飼養(yǎng)寵物成了不少民眾增添生活樂趣的方式。隨著寵物市場的快速發(fā)展，人們對于寵物的品種、血統(tǒng)等信息有著更高的關(guān)注。然而在 “寵物經(jīng)濟” 升溫的同時，寵物消費糾紛也頻頻發(fā)生。據(jù)國內(nèi)一項消委會的調(diào)查2，寵物消費類投訴主要聚焦于寵物宣傳與實際不符。其中，最主要問題是商家以低價品種冒充高價品種賣給消費者以謀取暴利。
動物的品種鑒定方法比較
目前對寵物品種鑒定主要是通過對動物的外貌特征和行為特征進(jìn)行分析和比較，這對于普通消費者具有不小的難度。如上圖所示，本身有些品種的寵物外貌就極其相似，再加上 “寵物美容” 的加工，基本可以達(dá)到真假難辨的程度。
相比于外貌和行為特征，遺傳特征可以更準(zhǔn)確地鑒定動物的品種，比如基因分型就是一種動物的精準(zhǔn)品種鑒定方法。通過對動物的 DNA 進(jìn)行 PCR (聚合酶鏈反應(yīng)) 擴增和測序，可以檢測特定的基因或基因組合，從而精準(zhǔn)地確定動物的品種。
該技術(shù)對品種鑒定的準(zhǔn)確率遠(yuǎn)高于外貌和行為特征鑒定的方法。它不僅可以用來進(jìn)行鑒定寵物品種的鑒定，還可以準(zhǔn)確鑒定寵物的血緣關(guān)系 (如父母、兄弟姐妹等)，篩查寵物遺傳疾病和輔助寵物的選種育種等工作。另外，基因分型也是寵物個體永久且不可偽造的身份標(biāo)識，可用于對丟失或被盜的寵物進(jìn)行身份鑒定。
動物的精準(zhǔn)品種鑒定應(yīng)用領(lǐng)域
動物精準(zhǔn)品種鑒定除了上述在寵物市場方面的應(yīng)用，在其它領(lǐng)域也具有十分重要的應(yīng)用：
– 通過進(jìn)行精準(zhǔn)的品種鑒定，可以檢測動物是否攜帶特定的遺傳疾病基因，從而幫助飼主更好地了解寵物的健康狀況，進(jìn)行相應(yīng)的健康管理和疾病預(yù)防。
– 在畜牧業(yè)中，對于畜禽的品種和血統(tǒng)信息管理，以及對于提高養(yǎng)殖效益和優(yōu)化育種計劃具有重要意義。
– 在科研領(lǐng)域，需要對實驗動物野生型和突變型進(jìn)行精準(zhǔn)的鑒定，研究特定基因分型對于生理、病理和藥物的影響。
– 在動物保護(hù)領(lǐng)域，通過對野生動物進(jìn)行精準(zhǔn)的品種鑒定，可以更好地了解野生動物的遺傳多樣性、種群結(jié)構(gòu)和遷徙路徑等信息，從而進(jìn)行科學(xué)研究和保護(hù)管理。
干血斑：方便的血樣采集
目前用于動物品種鑒定的基因分型采用的方法是 PCR 法 (聚合酶鏈反應(yīng))，需要在診所由醫(yī)師抽取寵物的靜脈血液進(jìn)行采樣。靜脈取血的取血量大，且過程比較復(fù)雜，需要動物醫(yī)師具有豐富的經(jīng)驗和飼主的配合。取血過程中，寵物往往會出現(xiàn)抵觸情緒，有時甚至?xí)艿襟@嚇。
干血斑 (Dried blood spots, DBS) 是一種新型的血液采集和儲存方法。它將微升級末梢血采集到樣品卡上，干燥后形成斑點。該方法采樣過程簡單方便，飼主可自行操作；侵入性小，特別適合對小型動物 / 寵物和實驗動物進(jìn)行血樣采集。相比于液態(tài)血，固態(tài)的干血斑具備更好的穩(wěn)定性和生物安全性，可實現(xiàn)樣品的常溫運輸，更可以以更溫和的條件儲存樣品，構(gòu)建生物樣本庫。?
DBS 干血斑應(yīng)用案例:
轉(zhuǎn)基因小鼠的基因分型
轉(zhuǎn)基因小鼠在繁殖后，由于基因重組，第二代小鼠需要進(jìn)行轉(zhuǎn)基因遺傳鑒定，以保持傳代后基因型的一致。目前的通常做法是剪取小鼠尾部或耳部組織樣品，然后提取核酸進(jìn)行鑒定。而干血斑采樣是一種微創(chuàng)采樣技術(shù)，創(chuàng)口小，需要的血量小，可減少小鼠損傷。
樣本
轉(zhuǎn)基因小鼠干血斑 (客戶提供的純化核酸樣本)?
檢測目標(biāo)
轉(zhuǎn)基因小鼠特異性基因序列
卡片
Ahlstrom AutoCollectTM?
樣本運輸條件
室溫
提取方法
直接提取，spin column 純化
檢測方法
PCR (聚合酶鏈反應(yīng))，瓊脂凝膠電泳
結(jié)果
通過 DBS 干血斑微量采樣，可成功鑒定出小鼠基因型。其方便、微量的采血和樣本室溫運輸?shù)奶攸c使其在動物的精準(zhǔn)品種鑒定領(lǐng)域具有巨大的發(fā)展?jié)摿Α?/p>
同期加推
第十五屆東西部小動物臨床獸醫(yī)師大會，集合由 57 個省市小動物獸醫(yī)師學(xué)（協(xié)）會的力量，共同舉辦。大會旨在推動中國小動物臨床獸醫(yī)技術(shù)與國際接軌，提升中國小動物獸醫(yī)師的整體水平，推廣世界先進(jìn)小動物診療技術(shù)，展示國際領(lǐng)先的寵物醫(yī)療設(shè)備、寵物藥品、飼料及試劑等。
大會將于 2023 年 5 月 23 日 – 25 日在青島舉行，力揚將參展此次盛會，推出 CAMAG 全自動干血斑萃取系統(tǒng) DBS-MS 500，從自動化方向?qū)鹘y(tǒng)干血斑技術(shù)進(jìn)行的一次全面升級，可實現(xiàn)全自動、快速、無人值守的干血斑樣品制備，并可結(jié)合質(zhì)譜、PCR、NGS 測序及 ELISA 等檢測技術(shù)，應(yīng)用于以下領(lǐng)域：
健康生物標(biāo)記物檢測
治療藥物監(jiān)測
基因組檢測
感染檢測
生物樣本庫
藥物的臨床前試驗
食品安全
