冬奧會(huì)新亮點(diǎn)：興奮劑檢測(cè)將首次采用DBS干血斑（點(diǎn)）技術(shù)
虎年大年初四 (2022年2月4日)，在歡度新春佳節(jié)之際，我們也將迎來2022北京冬奧會(huì)。
本屆冬奧會(huì)有眾多精彩看點(diǎn)，身形矯健、奮勇拼搏的運(yùn)動(dòng)員，激動(dòng)人心、動(dòng)人心魄的雪上運(yùn)動(dòng)賽項(xiàng)，還有多項(xiàng)頂尖科技將集體亮相，創(chuàng)下歷屆冬奧會(huì)第一：第一個(gè)全5G覆蓋的國際重大體育賽事；媒體轉(zhuǎn)播全面上云；“冰絲帶”(國家速滑館)是目前世界上最大的采用二氧化碳跨臨界直冷制冰技術(shù)打造的多功能全冰面，碳排放趨近于零；DBS干血斑技術(shù)正式成為冬奧會(huì)興奮劑檢測(cè)方法……
北京冬奧會(huì)興奮劑檢測(cè)的新亮點(diǎn)：?DBS
一直以來，為保證體育賽事的公平公正公開，興奮劑檢測(cè)已成為運(yùn)動(dòng)員們賽前必不可少的體檢項(xiàng)目。
興奮劑檢測(cè)可采用尿檢和血檢。尿檢的取樣需要由專人陪同，涉及“隱私性”;血檢則強(qiáng)調(diào)專業(yè)性和程序正確性，必須由具備醫(yī)學(xué)資質(zhì)的專業(yè)人士，嚴(yán)格使用取血器材來抽取血樣，且抽血程序需要得到運(yùn)動(dòng)員的認(rèn)可和簽字確認(rèn)。
自2019年某運(yùn)動(dòng)員在興奮劑檢測(cè)中砸碎血樣瓶引發(fā)國際體壇重大風(fēng)波后，WADA(世界反興奮劑組織)就計(jì)劃引入一種新型的樣本采集方式，力求解決運(yùn)動(dòng)員興奮劑檢測(cè)的取樣問題，避免同類事件再次發(fā)生。同年10月，由WADA牽頭發(fā)起，包括中國反興奮劑中心在內(nèi)的全球7大國家反興奮劑中心和國際組織共同決定將大力推行DBS方法，目標(biāo)在2022年北京冬季奧運(yùn)會(huì)和殘奧會(huì)上實(shí)現(xiàn)使用DBS作為常規(guī)方法進(jìn)行興奮劑檢測(cè)。
DBS (Dried Blood Spot)的中文是干血斑 / 干血點(diǎn)(將指血滴在專用卡紙上，干燥后形成的斑點(diǎn)),可用于微量血液樣本的儲(chǔ)存、運(yùn)輸和分析檢測(cè)。與傳統(tǒng)的血檢方式相比，DBS具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)：采集方便，可由運(yùn)動(dòng)員自行獨(dú)立完成;微量采樣，幾滴指血即可;固態(tài)血液樣品安全、穩(wěn)定，運(yùn)輸和儲(chǔ)存方便。
因此，DBS在運(yùn)動(dòng)員興奮劑檢測(cè)中的應(yīng)用，不僅適用于更大規(guī)模、更大覆蓋面的檢查，進(jìn)而更有力地打擊使用興奮劑的違規(guī)者;還可以更好地保護(hù)運(yùn)動(dòng)員的隱私，提高運(yùn)動(dòng)員對(duì)于興奮劑檢測(cè)的依從性，尤其是在全球新冠病毒大流行的背景下，DBS可以通過更少的人際接觸展開興奮劑的檢查工作。
解決?DBS分析“痛點(diǎn)”?，?CAMAG領(lǐng)跑反興奮劑檢測(cè)
隨著DBS方法在興奮劑檢測(cè)中的大力推廣應(yīng)用，興奮劑檢測(cè)的頻率和覆蓋面將大幅增加。然而，在海量的樣品面前，傳統(tǒng)的DBS樣品前處理方法已經(jīng)不再適用，打孔-洗脫-超聲-離心等多步驟，不僅費(fèi)時(shí)耗力，而且難以質(zhì)控，也成為DBS分析的最大瓶頸。
鑒于此，瑞士 CAMAG 公司依靠多年來在DBS樣品處理領(lǐng)域積累的豐富經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)，推出新一代全自動(dòng)干血斑樣品處理系統(tǒng)：DBS-MS 500 HCT?！癉BS-MS 500 HCT可直接萃取DBS樣品，連續(xù)制備2,000個(gè)樣品，1個(gè)樣品的制備僅需2分鐘，無縫偶聯(lián)主流的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜LC-MS/MS，高效實(shí)現(xiàn)樣品全自動(dòng)分析，并適用于萃取痕量的內(nèi)源性和外源性物質(zhì)。”CAMAG 中國總代理力揚(yáng)企業(yè)的產(chǎn)品經(jīng)理介紹說。
一直以來，DBS分析過程中斑點(diǎn)面積還原成全血體積的準(zhǔn)確性是一個(gè)“痛點(diǎn)”問題。由于每個(gè)人的HCT(血細(xì)胞比容)不一樣，轉(zhuǎn)換因子會(huì)受到HCT的影響，因此，測(cè)量HCT就成為了一個(gè)突破口。
由于運(yùn)動(dòng)員在運(yùn)動(dòng)前后會(huì)有大量體液的流失，這會(huì)造成HCT發(fā)生劇烈的變化，從而降低其DBS興奮劑檢測(cè)的準(zhǔn)確性。新一代全自動(dòng)干血斑樣品處理系統(tǒng)DBS-MS 500 HCT裝有HCT分析模塊，通過分析每個(gè)DBS樣品的HCT值，可以消除HCT對(duì)全血體積定量不準(zhǔn)確性的影響，從而大幅提高分析的準(zhǔn)確度，進(jìn)而大幅提高運(yùn)動(dòng)員DBS興奮劑檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
目前DBS-MS 500 HCT已成功應(yīng)用于自行車運(yùn)動(dòng)員的興奮劑檢測(cè)。曲馬多(Tramadol)，是一種阿片類藥物 ，主要用作鎮(zhèn)痛藥，可緩解普通到嚴(yán)重的疼痛。由于其在競(jìng)技自行車運(yùn)動(dòng)中的濫用，2019年國際自行車聯(lián)盟已將其列為禁用藥物。針對(duì)曲馬多 (tramadol)及其代謝物O-去甲基曲馬多(O-desmethyltramadol)，CAMAG 開發(fā)了一種方法，能夠?qū)崿F(xiàn)4分鐘從樣品到結(jié)果的全自動(dòng)分析(圖1)。研究者對(duì)26個(gè)真實(shí)樣品的進(jìn)行傳統(tǒng)血檢和DBS檢測(cè)，并將兩種方法進(jìn)行了交叉驗(yàn)證。結(jié)果顯示，借助DBS-MS 500 HCT，DBS檢測(cè)和傳統(tǒng)血檢的結(jié)果一致性良好(圖2)，證明了DBS興奮劑檢測(cè)的可行性。
圖 1
圖 2
DBS興奮劑檢測(cè)?，中國在行動(dòng)
反興奮劑是一項(xiàng)長期而艱決的工作，需要全球各國的共同合作與努力。中國反興奮劑中心作為全球DBS項(xiàng)目的發(fā)起者之一，全方位參與項(xiàng)目的規(guī)則和方法研究。中國反興奮劑中心主任陳志宇表示，在全面總結(jié)、汲取備戰(zhàn)東京奧運(yùn)會(huì)史上最嚴(yán)反興奮劑工作成功經(jīng)驗(yàn)基礎(chǔ)上，中國反興奮劑中心結(jié)合冬季項(xiàng)目備戰(zhàn)的特點(diǎn)，制定了“更嚴(yán)”的北京冬奧會(huì)反興奮劑工作方案和措施，以“零容忍”的態(tài)度全力實(shí)現(xiàn)北京冬奧會(huì)興奮劑問題“零出現(xiàn)”目標(biāo)。
反興奮劑中心與國際同行合作開展的干血點(diǎn)檢測(cè)項(xiàng)目將在2022年北京冬奧會(huì)和冬殘奧會(huì)中執(zhí)行。2021年6月，反興奮劑中心發(fā)布《反興奮劑中心關(guān)于開展干血點(diǎn)興奮劑檢查的通知》，并正式啟動(dòng)DBS興奮劑檢查檢測(cè)工作。截至2021年10月底，北京冬奧會(huì)備戰(zhàn)興奮劑檢查總例數(shù)已突破4000例，到運(yùn)動(dòng)員進(jìn)村，還將實(shí)施超過2000例檢查。